新的白血病相关基因LRP15真核表达载体构建及在K562细胞中的表达

徐周敏; 楼方定; 于力; 卢学春; 杨龙; 吕鸣; 吕有灵; 陈坚; 章菲菲

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武警医学 ›› 2003, Vol. 14 ›› Issue (11) : 647-649.

论文

新的白血病相关基因LRP15真核表达载体构建及在K562细胞中的表达

徐周敏;楼方定;于力;卢学春;杨龙;吕鸣;吕有灵;陈坚;章菲菲

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Construction of eukaryotic expression vectors of human LRP15 gene and its expression in K562 cells

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摘要

目的构建LRP15基因开放阅读框架(ORF)序列的真核表达载体,并观察其在K562细胞中的表达情况.方法采用RT-PCR方法自1例白血病患者中克隆LRP15cDNA片段,将目的基因LRP15克隆入pGEM-T载体中并进行酶切鉴定和DNA序列测定.将鉴定过的DNA片段插入真核质粒pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcDNA-LRP15.脂质体介导法将其转染K562细胞,72 h以RT-PCR方法检测转染细胞中LRP15基因的表达情况.结果酶切鉴定和序列分析证实,重组质粒含有人LRP15基因ORF序列;转染实验表明LR15基因能在K562细胞中表达.结论成功构建LRP15基因真核表达载体,并在K562细胞中获得表达,为进一步研究LRP15基因的功能奠定了基础.

关键词

LRP15基因 / 真核表达 / K562细胞

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徐周敏;楼方定;于力;卢学春;杨龙;吕鸣;吕有灵;陈坚;章菲菲. 新的白血病相关基因LRP15真核表达载体构建及在K562细胞中的表达[J]. 武警医学. 2003, 14(11): 647-649

Construction of eukaryotic expression vectors of human LRP15 gene and its expression in K562 cells[J]. Medical Journal of the Chinese People Armed Police Forces. 2003, 14(11): 647-649