蛋白激酶Cδ亚型cDNA的克隆及其序列分析

董(王乐)瑾; 李楚彦; 朱江; 谢文利; 晋玉章; 赵艳威; 孙静

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武警医学 ›› 2006, Vol. 17 ›› Issue (11) : 807-810.

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蛋白激酶Cδ亚型cDNA的克隆及其序列分析

董(王乐)瑾;李楚彦;朱江;谢文利;晋玉章;赵艳威;孙静

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Molecular cloning and sequence analysis of recombinant cDNA encoding protein kinase C δ isoform

DONG Lijin;LI Chuyan;ZHU Jiang;XIE Wenli;JIN Yuzhang;ZHAO Yanwei;SUN Jing

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摘要

目的研究中国仓鼠卵巢上皮细胞是否表达蛋白激酶Cδ亚型.方法参照GeneBank数据库PKC δ亚型的cDNA序列;通过EMBL-EBI数据库的CLUSTALW,选取种属间同源性最高的序列;利用GENERUNNER软件设计PKC δ亚型的特异引物;RT-PCR扩增CHO细胞PKC δ亚型的cDNA序列;利用AT克隆技术将PKC δ连接到pGEM-T载体上,经蓝白斑筛选,酶切鉴定后测序;Western blotting方法检测CHO细胞中PKC δ亚型.结果运用RT-PCR和Western blotting技术证实CHO细胞表达PKC δ亚型,并经测序证实.结论 CHO细胞中发现PKC δ亚型的存在,为深入研究PKC δ亚型的结构、功能及与细胞内信号转导通路的关系奠定基础.

关键词

蛋白激酶C / RT-PCR / Western blotting / 克隆

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董(王乐)瑾;李楚彦;朱江;谢文利;晋玉章;赵艳威;孙静. 蛋白激酶Cδ亚型cDNA的克隆及其序列分析[J]. 武警医学. 2006, 17(11): 807-810

DONG Lijin;LI Chuyan;ZHU Jiang;XIE Wenli;JIN Yuzhang;ZHAO Yanwei;SUN Jing. Molecular cloning and sequence analysis of recombinant cDNA encoding protein kinase C δ isoform[J]. Medical Journal of the Chinese People Armed Police Forces. 2006, 17(11): 807-810