跌打紫金丸是由土鳖虫、乳香、没药、红花、川芎、当归等15味中药材制备而成的大蜜丸，为传统自拟处方制剂，临床应用多年，功能活血化瘀，通络消肿。用于跌打损伤、闪腰岔气、伤筋折骨等疗效显著。笔者对制剂中的8味药材进行了鉴别，建立了该制剂的质量标准。1 仪器与试剂1.1 仪器 GB303型电子分析天平（瑞士梅特勒公司），XSP-18S型显微镜（南京江南光学仪器厂），ZF-I型三用紫外分析仪（上海顾村电光仪器厂），CQ50超声波清洗器（上海超声仪器厂），高效硅胶G薄层板（20 cm×5 cm，安徽良臣硅源材料有限公司）。1.2 试剂 跌打紫金丸（首都医科大学附属北京世纪坛医院中药制剂室生产，批号：20110403），水合氯醛、醋酸乙酯、环己烷、乙醚、苯、香草醛、硫酸均为分析纯。2 方 法2.1 显微鉴别 （1）取跌打紫金丸1丸，从中间切开，挑取适量样品，置载玻片中央，滴加水合氯醛试液2滴，透化后装片。置显微镜下观察。2.2 薄层色谱鉴别2.2.1 样品的制备 按制剂处方、制法和配制规程，制备跌打紫金丸样品。2.2.2 阴性对照品的制备 按制剂处方、制法和配制规程，制备跌打紫金丸阴性对照品3份。其中第1份不含当归、第2份不含乳香、第3份不含没药。2.2.3 当归薄层色谱鉴别2.2.3.1 供试品溶液的制备 取2.2.1项下制备的样品9 g，剪碎，加硅藻土6 g，研匀，加醋酸乙酯30 ml，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1 ml溶解为供试品溶液。2.2.3.2 阴性对照品溶液的制备 取2.2.2项下制备的第1份阴性对照样品9 g，照供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液。2.2.3.3 对照药材溶液的制备 取当归对照药材1 g，照供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液。2.2.3.4 薄层色谱法试验 参照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B，吸取上述3种溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-醋酸乙酯（8∶2）为展开剂，展开距离15 cm，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。2.2.4 乳香薄层色谱鉴别2.2.4.1 供试品溶液的制备 取2.2.1项下制备的样品9 g，剪碎，加硅藻土6 g，研匀，置具塞锥形瓶中，加乙醚30 ml，放置60 min，间歇振摇3次，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醚1 ml使溶解，作为供试品溶液。2.2.4.2 阴性对照品溶液的制备 取2.2.2项下制备的第2份阴性对照品9 g，照供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。2.2.4.3 对照药材溶液制备 取乳香对照药材1 g，照供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。2.2.4.4 照薄层色谱法试验 参照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B，吸取上述三种溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯（19∶1）为展开剂，展开距离15 cm，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105 °C加热至斑点显色清晰。2.2.5 没药薄层色谱鉴别2.2.5.1 供试品溶液的制备 取2.2.1项下制备的样品9 g，剪碎，加硅藻土6 g，研匀，置具塞锥形瓶中，加乙醚30 ml，放置60 min，间歇振摇3次，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醚1 ml使溶解，作为供试品溶液。2.2.5.2 阴性对照品溶液的制备 取2.2.2项下制备的第3份阴性对照品9 g，照供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。2.2.5.3 对照药材溶液制备 取没药对照药材1 g，照供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。2.2.5.4 薄层色谱法试验 参照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B，吸取上述3种溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-醋酸乙酯（8∶2）为展开剂，展开距离15 cm，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105 °C加热至斑点显色清晰。3 结 果3.1 显微鉴别结果 （1）土鳖虫：体壁碎片黄色或棕红色，有圆形毛窝，直径8~24 μm，有的具长短不一的刚毛;（2）熟大黄：草酸钙簇晶大，直径60~140 μm;（3）续断：草酸钙簇晶，直径约45 μm，存在于淡棕色皱缩的薄壁细胞中，常数个排列成行;（4）红花：花粉粒类圆形或椭圆形，直径43~46 μm，外壁具短刺和点状雕纹，有3个萌发孔;（5）川芎：木栓细胞深黄棕色，表面观呈多角形，微波状弯曲。3.2 薄层色谱鉴别结果3.2.1 当归 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点（Rf值为0.58和0.66），阴性对照品相应位置上无荧光斑点（图1）。3.2.2 乳香 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点（Rf值为0.25、0.42、0.57和0.75）。阴性对照品相应位置上无斑点（图2）。3.2.3 没药 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点（Rf值为0.33）。阴性对照品相应位置上无斑点（图3）。4 讨 论4.1 显微鉴别 土鳖虫的体壁、熟大黄、续断的草酸钙簇晶、红花的花粉粒、川芎的木栓细胞各具显著的显微特征，在显微镜下易于识别。显微鉴别法可作为上述五味药材在本方中的定性鉴别方法。4.2 薄层色谱鉴别4.2.1 提取条件的选择 文献［1］报道的当归供试品溶液的制备较为复杂，耗时较长。笔者简化了当归供试品溶液的制备，鉴别结果良好。乳香中含有约15种萜类等挥发性成分及乳香酸等不挥发性成分［2-4］，没药亦含有约45种挥发性成分［4］，二者均选用乙醚作为溶剂萃取。因乙醚极易挥发，无论采用回流提取，还是超声提取的方法均对环境及操作者有很大的危害，故笔者采用“供试品中加入乙醚放置60 min，间歇振摇3次，滤过”的提取方法。4.2.2 展开剂的选择 在没药的薄层色谱研究中，曾以苯-醋酸乙酯（19∶1）为展开剂［5］，薄层色谱显示斑点重叠，展开效果不理想。换用环己烷-醋酸乙酯（8∶2）后，薄层色谱主斑点分离较好。故采用环己烷-醋酸乙酯（8∶2）作为没药薄层色谱鉴别的展开剂。4.2.3 乳香、没药、当归3味药材的薄层色谱试验结果 斑点集中、层次清晰、重复性好，空白无干扰，具有可操作性，可作为上述3味药材在本方中的定性鉴别方法。