S100A2全长基因真核表达载体pEGFP-N2-S100A2的构建及其在胃癌细胞系BGC-823中的表达

李海军; 王孟薇; 吴本俨; 王卫华; 王昌正; 朱鸣

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武警医学 ›› 2007, Vol. 18 ›› Issue (08) : 577-580.

论文

S100A2全长基因真核表达载体pEGFP-N2-S100A2的构建及其在胃癌细胞系BGC-823中的表达

李海军;王孟薇;吴本俨;王卫华;王昌正;朱鸣

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Construction of complete S100A2 eukaryotic expression vector and its expression in BGC-823 cell line

LI Haijun;WANG Mengwei;WU Benyan;WANG Weihua;WANG Changzheng;ZHU Ming

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摘要

目的克隆S100A2 cDNA,构建pEGFP-N2-S100A2重组表达载体,转染胃癌细胞系BGC-823,为探讨其对胃癌细胞系的影响奠定实验基础.方法应用RT-PCR 和DNA 重组技术构建pEGFP-N2-S100A2 融合蛋白表达载体,质粒经测序正确后,用脂质体转染BGC-823 细胞.结果重组质粒经限制性酶切鉴定得到与S100A2全长基因长度一致(294 bp) 的酶切产物; 测序分析证实,重组质粒中含有一与GenBank 上登录的S100A2基因(NM-005978) 序列完全一致的序列,表明成功地完成了表达载体的构建; 荧光显微镜下可见转染的BGC-823 细胞有绿色荧光蛋白的表达.结论构建完成真核表达载体pEGFP-N2-S100A2,S100A2基因在BGC-823细胞内成功表达.

关键词

真核载体 / 荧光蛋白 / 胃癌 / 基因转染

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李海军;王孟薇;吴本俨;王卫华;王昌正;朱鸣. S100A2全长基因真核表达载体pEGFP-N2-S100A2的构建及其在胃癌细胞系BGC-823中的表达[J]. 武警医学. 2007, 18(08): 577-580

LI Haijun;WANG Mengwei;WU Benyan;WANG Weihua;WANG Changzheng;ZHU Ming. Construction of complete S100A2 eukaryotic expression vector and its expression in BGC-823 cell line[J]. Medical Journal of the Chinese People Armed Police Forces. 2007, 18(08): 577-580