BIK和SOCS3相互作用的筛选和鉴定

张翠莉; 刘萍

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武警医学 ›› 2009, Vol. 20 ›› Issue (02) : 137-141.

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BIK和SOCS3相互作用的筛选和鉴定

张翠莉;刘萍

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Isolation and identification of SOCS3 interacting with BIK

ZHANG Cuili;LIU Ping

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摘要

目的利用酵母双杂交技术筛选促凋亡因子BIK的相互作用蛋白.方法利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增BIK全长ORF,构建pDBLeu-BIK载体.转化MaV203,检测细胞毒性和自激活作用,确定His基础表达的3AT浓度,依次转化成人肝cDNA文库.在营养缺陷型培养基上挑去三阳性克隆,进行回转验证,以及利用GST-pull down、co-IP在体内外进行验证.结果成功构建pDBLeu-BIK载体,转化酵母细胞MaV203,无细胞毒性、无自激活作用,3AT浓度为25mmol/L.经回转实验、GST-pull down、co-IP证实了BIK和细胞因子信号通路抑制因子3(SOCS3)之间具有相互作用.结论 BIK和SOCS3之间的相互作用可能是凋亡调控的新机制.

关键词

BIK / 细胞因子信号通路抑制因子3 / 酵母双杂交

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张翠莉;刘萍. BIK和SOCS3相互作用的筛选和鉴定[J]. 武警医学. 2009, 20(02): 137-141

ZHANG Cuili;LIU Ping. Isolation and identification of SOCS3 interacting with BIK[J]. Medical Journal of the Chinese People Armed Police Forces. 2009, 20(02): 137-141