稳定表达人VEGF165的NIH/3T3细胞株的筛选与鉴定

汤苏阳; 谢芳; 杨力; 郑岩; 夏炜; 易成刚; 陈晓芳

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武警医学 ›› 2010, Vol. 21 ›› Issue (06) : 467-469.

论文

稳定表达人VEGF165的NIH/3T3细胞株的筛选与鉴定

汤苏阳;谢芳;杨力;郑岩;夏炜;易成刚;陈晓芳

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Screening and identificating of NIH/3T3 cell strains to VEGF165 mediated by lentiviral vectors

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摘要

目的培养NIH/3T3细胞,并进行慢病毒载体介导的VEGF165基因转染,为建立转基因小鼠血管瘤模型奠定基础.方法采取贴壁培养法分离培养NIH/3T3细胞,细胞随机分为3组,分别为Lenti-VEGF165-EGFP 重组慢病毒载体转染组、Lenti-EGFP慢病毒转染组和未转染组,转染后72 h荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白的表达,流式细胞仪分选后用ELISA方法检测VEGF165外分泌.结果 ELISA 检测转染后小鼠NIH/3T3细胞,Lenti-VEGF165-EGFP 重组慢病毒载体感染组、Lenti-EGFP慢病毒转染组和未转染组培养上清中VEGF165浓度分别为(205±15)、0、0 ng/L(P<0.05) 结论 NIH/3T3细胞获得慢病毒载体介导的VEGF165表达基因修饰且稳定传代,为下一步血管瘤动物模型研究奠定了基础.

关键词

小鼠成纤维细胞 / VEGF165基因 / 慢病毒 / 转染

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汤苏阳;谢芳;杨力;郑岩;夏炜;易成刚;陈晓芳. 稳定表达人VEGF165的NIH/3T3细胞株的筛选与鉴定[J]. 武警医学. 2010, 21(06): 467-469

Screening and identificating of NIH/3T3 cell strains to VEGF165 mediated by lentiviral vectors[J]. Medical Journal of the Chinese People Armed Police Forces. 2010, 21(06): 467-469