人破骨细胞的体外培养及鉴定

刘水涛; 雷鸣; 安佰京; 杨军; 张鹏礼; 邢更彦

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武警医学 ›› 2011, Vol. 22 ›› Issue (05) : 381-384.

论文

人破骨细胞的体外培养及鉴定

刘水涛;雷鸣;安佰京;杨军;张鹏礼;邢更彦

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Culture and identification of human osteoclasts in vitro

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摘要

目的:探索人破骨细胞的体外培养及鉴定方法,为各类试验研究提供大量高活性破骨细胞.方法:分离骨髓血得到单个核细胞,用不同培养液、诱导剂在不同浓度下培养破骨细胞,通过TRAP染色鉴定破骨细胞形态,ELISA法检测特异性蛋白表达水平,扫描电镜分析骨片骨陷窝面积.结果:用α-MEM培养液,10(-7)mmol/L浓度的1,25(OH)2VD3或50ng/ml浓度的RANKL和30ng/ml的M-CSF作为诱导剂,所培养的破骨细胞多核、特异性蛋白表达水平高、蚀骨能力强.结论:用DMEM培养液和α-MEM培养液培养均是一种能在体外诱导生成大量人破骨细胞的方法.同时,建议采用1,25(OH)2VD3作为诱导剂.