白雪玲,毛 霞,张 冰,曹丰斌,张东华
武警医学. 2012, 23(8): 678-678.
目的 探讨CML28分子在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)细胞系K562细胞增殖与凋亡调控中的作用机制。方法 体外培养K562细胞,电转染特异性CML28小分子干扰RNA(small interfering RNA, siRNA),收集转染特异性Si-hCML2848h的K562细胞,Trizol一步法提取细胞总RNA,逆转录合成cDNA,通过反转录RCR (reverse transcription PCR, RT-PCR)及实时定量PCR(real time PCR)检测其沉默效应;流式细胞术(flow cytometry ,FCM)和CFSE标记的细胞增殖试验检测干扰后K562细胞的凋亡与增殖情况,SPSS17.0软件进行统计学分析,分类资料采用非参数检验,计量资料采用方差分析或t检验,以P <0.05为有统计学意义。 结果 (1)K562细胞高表达CML28分子;(2)干扰后CML28分子的mRNA水平为0.524 ±0.044,较阴性对照组明显下降, 非参数检验Kruskal-Wallis H:P=0.003, 检验水准α=0.05, P<α,差异有统计学意义;(3)Si-hCML28干扰组凋亡率为(22.45±3.54)%,较阴性对照组显著增高,方差分析:P=0.005,检验水准α=0.05, P<α,差异有统计学意义;Si-hCML28干扰后K562细胞增殖显著受抑,t检验:P=0.01, 检验水准α=0.05,P<α,差异有统计学意义。 结论 (1)CML28分子在K562细胞中呈高表达,Si-hCML28可以显著抑制CML28分子的mRNA表达;(2)siRNA干扰CML28分子后,显著抑制K562细胞的增殖,诱导K562细胞的凋亡。这些结果提示CML28在K562细胞的增殖与凋亡调控中扮演着重要的角色。